为何使用 RNAscope ISH?
疾病分析的标准分子方法依赖于分散的细胞,这会导致空间信息缺失。然而,要完整充分地了解细胞行为背后的分子机制,需要借助关于亚细胞定位的补充信息,而此类信息仅可通过原位杂交来获得。RNAscope 分析是一种新型的多重核酸 ISH 技术,拥有专利探针设计,可放大靶标特异性信号而非背景噪音,从而提供清晰、实用的结果和较高的灵敏度和特异性。
开始使用 RNAscope ISH 技术
与拼图游戏类似,成功执行原位杂交技术 (ISH) 需要采用系统性、逐步式的方法,每次专注于一个过程阶段,然后进入下一个阶段。ACD 的 RNAscope ISH 技术让 ISH 在功能性和易用性方面迈出了巨大的一步,极大地简化了那些久经验证的方法,同时可常规提供单分子检测水平的灵敏度。虽然 ISH 不像四块拼图游戏那样简单,但与此前相比,我们大大提升了 ISH 的便捷性。
RNAscope ISH 技术手动分析
RNA 原位检测技术(ISH 和 FISH)已存在多年,而被视为金准则的微阵列芯片和 PCR 也是如此。然而,这些技术缺乏关于细胞和组织微环境中空间表达的临床相关信息。
Advanced Cell Diagnostics 的科学家彻底改变了 RNA ISH 方法,并在 2011 年推出了 RNAscope™ ISH,用于在完整单细胞中,从空间上对靶标 RNA 进行检测。RNAscope ISH 凭借其专有的探针设计,可同时扩大靶标特异性信号并抑制非特异性杂交引起的背景噪音,现已成为一种成熟可靠的技术,可提供手动和自动两种形式。
RNA ISH 技术自动分析
RNAscope 原位杂交技术已开发出了手动和自动方案。如果您需要高通量或自动化解决方案,ACD 已与 Leica Biosystems 和罗氏诊断合作,共同提供 RNAscope ISH 自动分析。
RNAscope ISH 技术分析选择表
RNAscope HD 棕色或红色 | RNAscope 双重 | RNAscope 多重荧光 (V2) | RNAscope HiPlex | BaseScope | BaseScope 双重 | miRNAscope | DNAscope | |
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分析类型 | 显色 | 显色 | 荧光 | 荧光 | 显色 | 显色 | 显色 | 显色 |
提供的检测重数 | 单重 | 双重 | 四重 | 12 重;最高可达 48 重 | 单重 | 双重 | 单重 | 双重 |
所用染料 | DAB - HRP 或 Fast Red - ALP | 绿色 - HRP Fast Red - ALP | TSA Plus/Opal 染料 | Alexa 488、Atto 550、Atto 647N、Alexa 750 | Fast Red - ALP | 绿色 - HRP Fast Red - ALP | Fast Red - ALP | Fast Red - ALP |
通道 | 通道 1 | 通道 1、2 | 通道 1、2、3、4 | 尾部 1、2、……12 | 通道 1 | 通道 1、2 | 通道 S1 | 通道 1、2 |
可用平台 |
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靶标大小 | >300 nt | >300 nt | >300 nt | >300 nt | 50-300 nt | 50-300 nt | 17-50 nt |
>3000 nt(载体/病毒)和 >20,000 nt(染色体)核苷酸 |
样本类型 |
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专业分析服务
专业分析服务提供符合 GCLP 的 RNAscope、BaseScope、miRNAscope 和 DNAscope 原位杂交 (ISH) 分析服务,以便为我们的学术和生物制药合作伙伴提供临床及临床前研究支持。